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2013-04-17
單克隆抗體的克隆化方法經(jīng)過抗體測定的陽性孔，可以擴(kuò)大培養(yǎng)，進(jìn)行克隆，以得到單個細(xì)胞的后代分泌單克隆抗體?？寺〉臅r間一般說來越早越好。因為在這個時期各種雜交瘤細(xì)胞同時旺盛生長，互相爭奪營養(yǎng)和空間，而產(chǎn)生抗體的細(xì)胞有被淹沒和淘汰的可能。但克隆時間也不宜太早，太早細(xì)胞性狀不穩(wěn)定，數(shù)量少也易丟失?？寺』年栃噪s交瘤細(xì)胞，經(jīng)過一段時期培養(yǎng)之后，也還會因為細(xì)胞突變或特定染色體的丟失，使部分細(xì)胞喪失產(chǎn)生抗體的能力，所以需要再次或多次克隆化培養(yǎng)?？寺』螖?shù)的多少由分泌能力強(qiáng)弱和抗原的免疫性強(qiáng)...2013-04-15
轉(zhuǎn)移因子生化應(yīng)用性能①轉(zhuǎn)移因子能夠?qū)⒐w的某一些特異性和非特異性細(xì)胞免疫功能，轉(zhuǎn)移給受體，擴(kuò)大受體的免疫反應(yīng)。②轉(zhuǎn)移因子有觸發(fā)和調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫功能，使未接觸過抗原的細(xì)胞致敏，T淋巴細(xì)胞分化增殖為效應(yīng)T細(xì)胞，發(fā)生增效反映，變成致敏淋巴細(xì)胞和釋放具有免疫活性的淋巴因子，攻擊體內(nèi)病毒等外來物。③活化巨噬細(xì)胞，增強(qiáng)協(xié)同參與免疫反應(yīng)的巨噬細(xì)胞識別、結(jié)合、吞噬和消化抗原的能力。④轉(zhuǎn)移因子還能提高體內(nèi)白介素II、干擾素等人多種細(xì)胞因子在體內(nèi)的，調(diào)整多項免疫指標(biāo)、作用于免疫系統(tǒng)的多個環(huán)節(jié)、糾正...2013-04-12
技術(shù)指導(dǎo)ELISA試劑盒包被方式將抗原或抗體固定在過程稱為包被（coating）。換言之，包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用于。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響。載體對不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán)，故更易吸附到固相載體表面。IgG對聚苯乙烯等固相具有較強(qiáng)的吸附力，其聯(lián)結(jié)多發(fā)生...2013-04-09
ELISA試劑盒酶標(biāo)記抗體的制備酶標(biāo)記抗體的制備方法主要有兩種，即戊二醛交聯(lián)法和過碘酸鹽氧化法。（1）戊二醛交聯(lián)法：戊二醛是一種雙功能團(tuán)試劑，它可以使酶與蛋白質(zhì)的氨基通過它而聯(lián)結(jié)。堿性磷酸一般用此法進(jìn)行標(biāo)記。交聯(lián)方法一步法、兩步法兩種。在一步法中戊二醛直接加入酶與抗體的混合物中，反應(yīng)后即得酶標(biāo)記抗體。ELISA中常用的酶一般都用此法交聯(lián)。它具有操作簡便、有效（結(jié)合率達(dá)60%-70%）和重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)。缺點(diǎn)是交聯(lián)反應(yīng)是隨機(jī)的，酶與抗體交聯(lián)時分子間的比例不嚴(yán)格，結(jié)合物的大小也不均...2013-04-07
化學(xué)試劑純度分類我國的試劑規(guī)格基本上按純度（雜質(zhì)含量的多少）劃分，共有高純、光譜純、基準(zhǔn)、分光純、優(yōu)級純、分析和化學(xué)純等7種。國家和主管部門頒布質(zhì)量指標(biāo)的主要優(yōu)級純、分級純和化學(xué)純3種。（1）優(yōu)級純，又稱一級品或保證試劑，99.8%，這種試劑純度zui高，雜質(zhì)含量zui低，適合于重要精密的分析工作和科學(xué)研究工作，使用綠色瓶簽。（2）分析純（AR），又稱二級試劑，純度很高，99.7%，略次于優(yōu)級純，適合于重要分析及一般研究工作，使用紅色瓶簽。（3）化學(xué)純（CP），又稱三級試劑，...2013-04-01
簡述成人胰腺消化、胰島分離方法：尸體胰腺原位灌洗后置UW液中，4℃保存運(yùn)輸。到實(shí)驗室后在4℃Euro-Collins液中清除非胰組織，從胰管內(nèi)插入穿刺針，絲線縫扎后用注射器灌注Liberase酶溶液（1.5mg/ml）。胰腺充分膨脹后將胰腺切片，置消化罐中并放入數(shù)顆玻璃珠，加500μm孔徑的不銹鋼絲網(wǎng)，旋緊罐蓋。開啟蠕動泵將剩余的Liberase酶溶液泵入罐內(nèi)，控制罐內(nèi)溫度37℃，手動振搖消化罐循環(huán)消化，于10分鐘后開始取樣鏡檢，待大部分胰島分離后用冷的含10%胎牛血清（FB...2013-03-29
如何選擇陽性對照？陽性對照即是100%出現(xiàn)該結(jié)果的“實(shí)驗”組，材料是確定的；陰性對照則是肯定不會出現(xiàn)結(jié)果的“實(shí)驗組”，材料也是確定的；之所以加引號，是因為除了實(shí)驗需要驗證的變量，其他條件全部都是一樣的，用來排除其他實(shí)驗情況對結(jié)果產(chǎn)生的影響。例如，驗證一轉(zhuǎn)基因玉米是否有抗藥性，需要選擇同種的轉(zhuǎn)基因成功的抗藥玉米做陽性對照，無轉(zhuǎn)基因的做陰性對照，從而保證除了該基因其他條件一致；一個成功的實(shí)驗，通常情況下必須有陽性對照和陰性對照排除其他干擾情況如果您需要合適的陽性對照，請核查數(shù)據(jù)表...