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2025-08-19
一、核心定義干細(xì)胞療法是利用具有自我更新與多向分化潛能?的原始細(xì)胞，通過(guò)再生修復(fù)機(jī)制干預(yù)疾病的前沿技術(shù)。其核心在于：自我復(fù)制：無(wú)限增殖產(chǎn)生相同子代細(xì)胞；分化能力：在特定條件下轉(zhuǎn)化為神經(jīng)細(xì)胞、心肌細(xì)胞等功能細(xì)胞。二、來(lái)源與類型干細(xì)胞主要來(lái)源于三類途徑：胚胎干細(xì)胞取自早期胚胎，分化潛能最-強(qiáng)，但存在倫理限制。成體干細(xì)胞常見(jiàn)來(lái)源：胎盤、臍帶、骨髓、脂肪、牙髓等組織?；代表類型：間充質(zhì)干細(xì)胞（免疫原性低，可異體使用）。誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS）通過(guò)體細(xì)胞重編程技術(shù)獲得，規(guī)避倫理問(wèn)題。三...2025-08-13
一、物種匹配度（相似性原則）1.進(jìn)化相近物種優(yōu)先：非人靈長(zhǎng)類（猴等）用于神經(jīng)疾病、HIV研究（與人類基因相似度＞93%）豬用于心血管或器官-移植研究（心臟結(jié)構(gòu)與人類吻合度89%）嚙齒類（小鼠/大鼠）用于基礎(chǔ)研究（繁殖快、成本低）2.特殊功能匹配：兔（刺激性排卵）→避孕藥研究豚鼠（易過(guò)敏）→化妝品測(cè)試大鼠（無(wú)膽囊）→膽汁收集實(shí)驗(yàn)二、個(gè)體生理狀態(tài)控制三、標(biāo)準(zhǔn)化要求1.遺傳背景：近交系（如C57BL/6小鼠）需提供譜系證明基因編輯動(dòng)物提交三代穩(wěn)定性數(shù)據(jù)2.微生物控制：SPF級(jí)（無(wú)特...2025-08-05
霉菌是一類絲狀真菌，廣泛存在于潮濕、溫暖環(huán)境，通過(guò)菌絲體形成絨毛狀或絮狀菌落，依靠孢子繁殖傳播。它既能分解有機(jī)物維持生態(tài)平衡，也可能引發(fā)霉變、腐敗甚至人體感染。一、樣本采集與處理問(wèn)題1.采樣代表性不足固態(tài)樣品（如谷物、堅(jiān)果）因霉菌分布不均易漏檢，需采用五點(diǎn)采樣法并研磨至粒徑＜2mm以提高均質(zhì)性。關(guān)鍵措施：干燥樣品優(yōu)先選用耐高滲培養(yǎng)基（如DG18）同步培養(yǎng)。2.假陰性風(fēng)險(xiǎn)樣本放置＞4小時(shí)可致孢子活性顯著下降；臨床樣本中雖有癥狀但檢出陰性，可能因早期感染菌量不足、采樣不當(dāng)或檢測(cè)誤...2025-07-29
一、轉(zhuǎn)染基礎(chǔ)概念細(xì)胞轉(zhuǎn)染是將外源核酸（DNA/RNA）導(dǎo)入真核細(xì)胞的技術(shù)，分為瞬時(shí)轉(zhuǎn)染（外源基因短期表達(dá)）和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染（基因整合至基因組長(zhǎng)期表達(dá)）兩類。核心應(yīng)用包括基因功能研究、蛋白表達(dá)及基因治療開(kāi)發(fā)。二、常用轉(zhuǎn)染方法對(duì)比三、標(biāo)準(zhǔn)化操作流程（以脂質(zhì)體法為例）細(xì)胞準(zhǔn)備：接種對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，密度達(dá)70%-90%匯合。復(fù)合物制備：無(wú)血清培養(yǎng)基稀釋質(zhì)粒DNA與轉(zhuǎn)染試劑（如Lip2000）。室溫靜置15分鐘形成DNA-脂質(zhì)體復(fù)合物。轉(zhuǎn)染執(zhí)行：移除原培養(yǎng)基，加入復(fù)合物輕搖混勻。4-6小時(shí)后...2025-07-24
1.定義血漿：抗凝全血離心后獲得的液態(tài)組分，保留纖維蛋白原及全部凝血因子，呈淡黃色。血清：血液自然凝固后析出的透明液體，纖維蛋白原已轉(zhuǎn)化為纖維蛋白凝塊，故不含纖維蛋白原及部分凝血因子。2.核心成分差異3.制備工藝關(guān)鍵點(diǎn)血漿制備：全血+抗凝劑（EDTA/肝素）→離心分離禁止凝固，離心條件：4℃、2000g×15分鐘血清制備：全血無(wú)抗凝劑→37℃靜置30-60分鐘（凝血激活）→離心分離必須充分凝固，離心條件：室溫、3000g×10分鐘4.功能與應(yīng)用場(chǎng)景血漿功能：運(yùn)輸營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、維持...2025-07-17
ELISA試劑盒作為實(shí)驗(yàn)室常用檢測(cè)工具，其穩(wěn)定性直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性。了解變質(zhì)原因有助于規(guī)范存儲(chǔ)和使用流程。一、主要變質(zhì)原因1.儲(chǔ)存條件不當(dāng)溫度波動(dòng)：酶標(biāo)抗體等組分需2-8℃保存，反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致蛋白變性光照影響：HRP等光敏感組分暴露于強(qiáng)光下會(huì)失活濕度失控：干燥劑失效會(huì)導(dǎo)致微孔板受潮2.運(yùn)輸過(guò)程風(fēng)險(xiǎn)冷鏈斷裂（8℃持續(xù)2小時(shí)即可能影響效價(jià)）劇烈震動(dòng)導(dǎo)致包裝破損或組分混合3.操作污染重復(fù)使用移液槍頭導(dǎo)致交叉污染未冷藏的顯色液被微生物污染4.過(guò)期使用抗體效價(jià)隨時(shí)間自然衰減（通常保...2025-07-07
一、基本概念與來(lái)源定義：牛血清白蛋白（BovineSerumAlbumin,BSA）是從牛血清中分離的球狀蛋白質(zhì)，占牛血清總蛋白的50%-60%，是血漿中含量最豐-富的載體蛋白。分子特征分子量：66.5kDa（非糖基化）等電點(diǎn)：pH4.7-4.9消光系數(shù)：E1%=6.6（280nm）二、物理狀態(tài)特性固態(tài)特性外觀：白色至淡黃色凍干粉末含水量：≤5%（優(yōu)質(zhì)級(jí)）熱穩(wěn)定性：56℃下可保持10小時(shí)不變性溶液狀態(tài)溶解性：極易溶于水（1mg/mL可完-全溶解）構(gòu)象變化：pH聚集行為：濃度5...